Sigma:間質膠原酶IV,C5138-100MG,CAS:9001-12-1

屬性：

質量水平：200

形式：powder

specific activity：≥125 CDU/mg solid
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量：68-130 kDa

溶解性：TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 0.05-0.1 mg/mL at 37 °C

適用性：release of physiologically active rat hepatocytes tested

特色行業(yè)：Diagnostic Assay Manufacturing

運輸：wet ice

儲存溫度：?20°C

應用：

膠原酶已用于研究晚期糖基化終產物（AGE）所需的動脈組織的制備。該酶還與其他蛋白酶一起用于人腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮以及許多其他組織的解聚。它還可有效用于肝臟和腎臟的灌注研究、胰腺的消化以及非實質肝細胞的分離。該酶經過了肝細胞釋放的適用性測試，針對每只大鼠肝臟的100 mL總體積中的濃度大約為1 mg/mL。

來自組織溶梭菌的膠原酶已被用于：

1.制備用于消化腫瘤組織的膠原酶溶液

2.作為磷酸鹽緩沖生理鹽水的補充劑用于消化已切除的腸系膜脂肪組織

3.作為羅斯韋爾公園紀念研究所1640培養(yǎng)基（RPMI-1640）的補充劑用于消化結腸段

4.用于消化子宮內膜組織

5.制備用于消化去被膜的睪丸的酶A和酶B。

生化/生理作用：

組織溶梭菌產生兩類膠原酶。梭菌膠原酶比哺乳動物膠原酶更高效。它在膠原三螺旋中的多個裂解位點進行裂解。梭菌膠原酶與氣性壞疽中的細菌入侵有關。

從組織中進行細胞的有效釋放需要膠原酶和中性蛋白酶的作用。每摩爾的膠原酶可被四克的鈣原子（Ca2+）所激活。培養(yǎng)濾液中被認為至少含有7種分子量在68-130kDa之間的不同蛋白酶。最適pH為6.3-6.8。該酶通常用于消化組織樣品中的結締成分以釋放單個細胞。膠原酶處理可引起某些細胞的死亡。通常，使用0.1至5 mg/mL的濃度用于消化。反應時間可從15分鐘至數小時，并在不引起過多細胞死亡的情況下達到令人滿意的細胞解離效果。優(yōu)選含有鈣和BSA的Krebs Ringer緩沖液，而且Zn2+是活性所必需的。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

注意：

以原包裝形式，該產品在-20°C下可穩(wěn)定保存6年。在37℃、50℃和-20℃下30天內，FALGPA或蛋白酶活性沒有損失。如果分液（10mg/mL）形式快速冷凍并且在-20℃下冷凍保存，粗膠原酶的溶液可保持穩(wěn)定。進一步的凍融步驟會破壞溶液穩(wěn)定性。 當在冰上保持時，該產品可在7小時內保持100％活性。

單位定義：

一個膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸，5小時，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白，產生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時，pH7.5,37℃下產生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

制備說明：

溶液通常是在TESCA緩沖液（含有50mM TES、0.36mM氯化鈣，37℃時pH 7.4）中按1-2 mg/mL進行制備。
該產品還含有梭菌蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。

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